霍山石斛组织快繁与人工移栽

点击数：7682013-10-05 11:01:32　来源: 合肥霍山石斛专卖店_合肥霍山米斛_霍山铁皮石斛直销_石斛酒_安徽徽之味土特产有限公司直营店

新闻摘要:霍山石斛种子的无菌萌发对培养基的营养成分要求不高，在1/2MS上可以直接萌发，添加香蕉泥或是适宜的激素组合对未成熟的种胚发育具有一定的促进作用

      组织快繁由于霍山石斛野生资源日渐枯竭，从20世纪80年代开始，国内众多单位对其进行组织快繁技术研究。1983年，徐云等［9］首先开展霍山石斛种子无菌繁殖的试验研究。表明霍山石斛种子在自然界难以萌发，但在无菌培养基上，种子萌发率很高。随后由于受种子来源的限制，研究逐渐转向以霍山石斛野生苗或无菌种子实生苗的茎节、茎尖以及种子原球茎为材料，诱导再生不定芽，以实现试管苗的大量繁殖。归纳起来，当前霍山石斛的组织快繁可分为种子无菌萌发途径（见表1）、外植体器官发生途径（见表2）和类原球茎体胚胎发生途径（见表3）3种途径。表1  霍山石斛种子的无菌萌发（略）表2  霍山石斛试管苗的器官发生途径（略）表3  霍山石斛试管苗的类原球茎发生途径（略）    

　　霍山石斛种子的无菌萌发对培养基的营养成分要求不高，在1/2MS上可以直接萌发，添加香蕉泥或是适宜的激素组合对未成熟的种胚发育具有一定的促进作用。刘石泉等［17］对来自5个不同荚果的霍山石斛种子无菌苗种群进行RAPD检测发现，霍山石斛种子苗在不同发育阶段遗传相似系数较大，变异非常小；邱婧等［18］利用RAPD、ISSR和DALP 3种分子标记技术还证明不同继代次数的霍山石斛试管苗在遗传上没有差异，说明以种子建立霍山石斛的无性快繁体系是切实可行的。

　　种子经过萌发可以提供原球茎、无菌苗作为试管苗快繁的起始材料。当以无菌苗为起始材料时，通常以茎节、茎尖为外植体，在激素的作用下，或是从茎节叶腋、茎尖直接再生不定芽发育成苗，或是经过愈伤组织阶段再生不定芽。愈伤组织再生不定芽有器官发生和类原球茎发生两种方式。类原球茎是霍山石斛体细胞胚，除经过愈伤组织形成外，也可由茎节、茎尖以及种子原球茎直接诱导形成，其中最好的材料是种子原球茎。当将种子原球茎切成薄片，在含激素或不含激素的培养基上均可以在短时间内诱导大量的类原球茎形成，而且类原球茎可以在暗处长期继代培养，且遗传稳定［32］，在转入光照下即可发育成植株。秦自清［33］报道霍山石斛类原球茎制作的人工种子，其萌发率可达90%，萌发的幼苗存活率为80%，说明类原球茎具有很强的分化能力。类原球茎的另一个特点是可以在液体条件下大量增殖，本实验室研究表明平均每克类原球茎经液体增殖30 d后可再生近2 000株小苗，因此适合霍山石斛试管苗的工厂化生产。

　　人工移栽组织快繁的试管苗成功进行大田移栽和生长，是实现霍山石斛野生资源人工再生的关键。新形成的霍山石斛试管苗较为弱小，根系也不发达，不适宜田间移栽，需要经过壮苗阶段。目前，霍山石斛试管苗的壮苗主要采用激素配合香蕉、马铃薯提取物调节的方法［34］。霍山石斛人工移栽的经验最早来自于1958年胡天放关于霍山石斛由野生变为栽培的试验［35］，其后50年的进展十分缓慢（见表4）。虽然霍山石斛试管苗移栽在1985年获得成功［9］，但至今规模很小，大田移栽后成活率低的问题还没有从根本上得到解决。霍山石斛经过炼苗，其茎叶的耐旱能力较强，移栽1月后茎叶保持绿色，表现出成活的现象，此时统计成活率非常高，但3～4个月后，很多植株的根没有生长，茎叶开始死亡，最后存活率不到20%。根据白音［36］的调查，安徽作为霍山石斛的主产地，年均栽培石斛产量约有533 kg，根据我们的调查，其中铁皮石斛占有相当大的比例。表4  霍山石斛的人工栽培试验（略）